Die gezielte siRNA-Modifikation ist eine Methode zur Gen-Stilllegung, die auf der RNA-Interferenztechnologie basiert. Das Grundprinzip besteht darin, siRNA-Moleküle mit spezifischen Sequenzen zu verwenden, um bestimmte Gene anzugreifen und so die Expression der Gene zu hemmen. Diese Technologie ist ein wirksames Mittel zur Behandlung von Krankheiten, insbesondere bei der Behandlung von Krebs und Erbkrankheiten, und bietet breite Anwendungsmöglichkeiten.
Der Prozess des siRNA-Targetings umfasst drei Hauptschritte: Synthese, Reifung und Targeting. Zunächst wird die Vorläufer-mRNA der siRNA durch das Enzym Dicer in eine doppelsträngige RNA von etwa 21–23 Basen gespalten, und dann bindet die doppelsträngige RNA an den RNA-induzierten Gen-Silencing-Komplex (RISC), um eine funktionell reife siRNA zu bilden, die an die komplementären Sequenzen der mRNA bindet, um den Abbau der mRNA oder die Translationsrepression zu vermitteln und so den Effekt des Gen-Silencings zu erzielen. Der Effekt des Gen-Silencings wird realisiert.
Bei der Auswahl eines geeigneten Ziels wählen Wissenschaftler normalerweise die codierende Region in der mRNA-Sequenz des Zielgens aus und versuchen, Sequenzähnlichkeiten mit anderen Genen zu vermeiden, um unspezifische Zieleffekte zu minimieren. Um den Zieleffekt zu erhöhen, wird normalerweise ein Ziel von 1/3 der Region des Zielgens gewählt. Beim Entwurf von siRNA-Sequenzen werden normalerweise 21-23 Nukleotide lange RNA-Moleküle gewählt, die hauptsächlich aus Antisense- und Synonymsträngen bestehen. Um den Zieleffekt zu erhöhen, kann in der Mitte der Antisense- und Synonymstränge ein LuHu-Nukleotid hinzugefügt werden, um die Bildung einer stabilen Sekundärstruktur zwischen den Antisense- und Synonymsträngen zu verhindern.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die gezielte siRNA-Modifikation eine auf der RNA-Interferenztechnologie basierende Methode zur Gen-Silencing ist, die ein wirksames Instrument zur Krankheitsbehandlung darstellt.
