Bioorg Med Chem Lett. 2018 1. Mai;28(8):1363-1370. doi: 10.1016/j.bmcl.2018.03.005. Epub 3. März 2018 Ortsspezifische und hydrophile ADCs durch Disulfid-verbrückten Linker und verzweigtes PEG Zusammenfassung Kadcyla® (T-DM1), ein Antikörper-Wirkstoff-Konjugat (ADC) zur Behandlung von HER2+-Brustkrebs, wurde 2013 von der Food and Drug Administration (FDA) zugelassen. Als ADC mit zufälliger Lysin-Konjugation weist es Schwierigkeiten bei der DAR-Kontrolle auf und unbefriedigende PK aufgrund ungleichmäßiger DAR-Verteilung. Aufgrund der hydrophoben Natur des Zytotoxins DM1 führt es auch zu einer Aggregation während der Konjugation. Das Linker-Medikament in T-DM1, SMCC-DM1, ist hydrophob und erfordert einen bestimmten Prozentsatz an organischem Lösungsmittel wie DMA in der Konjugationslösung, was den Herstellungsprozess in einem mit organischen Lösungsmitteln kompatiblen Gerät einschränkt und zusätzliche Kosten verursacht. Um diese Probleme anzugehen, wurde eine ortsspezifische Konjugationsmethode entwickelt, die eine vollständige Reduktion des Antikörpers und eine vollständige Konjugation mit dem brückenartigen Konjugator-Medikament umfasst und auf der Arbeit von Caddick und Mitarbeitern basiert, um ein ortsspezifisches Antikörper-Medikament zu erhalten Konjugat mit DAR 4. Der brückenartige Konjugator wurde mit SMCC-DM1 und unterschiedlich langen hydrophilen Polyethylenglykol (PEG)-Einheiten zusammengesetzt. Durch den Einsatz einer PEG-Einheit in der Seitenkette des Linker-Medikaments kann der bei der Konjugation verwendete organische Lösungsmittel reduziert werden. Wenn die PEG-Länge etwa 26 Einheiten beträgt, wird für die Konjugation kein organisches Lösungsmittel mehr benötigt. Eine Verringerung der Menge an organischem Lösungsmittel bei der Konjugation könnte auch das Auftreten von Aggregationen während der Konjugation verringern. Darüber hinaus wurde in dem Artikel auch die Konjugationskonfiguration mit dem entworfenen Konjugator diskutiert. Die Bindungsaffinität der resultierenden ADCs zeigte keine signifikante Abnahme und der zellbasierte Assay und die Tierstudie haben vergleichbare Ergebnisse mit T-DM1 gezeigt. Schlüsselwörter: Antikörper-Wirkstoff-Konjugate; Maytansin DM1; PEGlyation; Standortspezifisch. Für weitere Produktinformationen kontaktieren Sie uns bitte unter: US-Tel: 1-844-782-5734 US-Tel: 1-844-QUAL-PEG CHN Tel: 400-918-9898 E-Mail: sales@sinopeg.com

ACS Omega. 23.08.2023;8(35):32043-32052. doi: 10.1021/acsomega.3c03952. eCollection 2023 5. September. Zytokompatibilitätsbewertung von PEG-Methylsulfon-Hydrogelen Zusammenfassung Mit Methylsulfon derivatisierte Poly(ethylen)glycol (PEG)-Makromere können mit thiolierten Liganden biofunktionalisiert und mit thiolbasierten Vernetzern vernetzt werden, um bioaktive PEG-Hydrogele für die In-situ-Zellverkapselung zu erhalten. Methylsulfonyl-Thiol (MS-SH)-Reaktionen bieten für diesen Zweck mehrere Vorteile im Vergleich zu anderen Vernetzungssystemen auf Thiolbasis. Sie verlaufen mit einer geeigneten und einstellbaren Kinetik für die Einkapselung, erreichen einen hohen Umwandlungsgrad mit guter Selektivität und erzeugen stabile Reaktionsprodukte. Unsere früheren Arbeiten haben die Zytokompatibilität von vernetzten PEG-MS/Thiol-Hydrogelen in Kontakt mit Fibroblasten gezeigt. Die Zytokompatibilität der In-situ-MS-SH-Vernetzungsreaktion selbst, die Methylsulfinsäure als Nebenprodukt an der Vernetzungsstelle erzeugt, muss jedoch noch bewertet werden. Diese Studien sind notwendig, um das Potenzial dieser Systeme für In-vivo-Anwendungen zu bewerten. Hier führen wir eine umfassende Zytokompatibilitätsstudie von PEG-Hydrogeln während der In-situ-Vernetzung durch die Methylsulfonyl-Thiol-Reaktion durch. Wir vergleichen diese Ergebnisse mit Maleimid-Thiol-vernetzten PEGs, die für Zellkulturen und In-vivo-Experimente gut etabliert sind und kein Nebenprodukt freisetzen. Wir zeigen, dass Fibroblasten und Endothelzellen nach der In-situ-Polymerisation von Methylsulfonyl-Thiol-Gelen auf der Oberseite der Zellschichten lebensfähig bleiben. Die Lebensfähigkeit der Zellen scheint besser zu sein als nach der In-situ-Vernetzung von Hydrogelen mit Maleimid-Thiol-Chemie. Der proinflammatorische Phänotyp der Endothelzellen ist niedrig und ähnelt dem, der durch die Maleimid-Thiol-Reaktion erhalten wird. Schließlich wird keine Aktivierung von Monozyten beobachtet. Insgesamt zeigen diese Ergebnisse, dass die Methylsulfonyl-Thiol-Chemie zytokompatibel ist und keine starken proinflammatorischen Reaktionen in Endothelzellen und Monozyten auslöst. Diese Ergebnisse machen Methylsulfonyl-Thiol-Chemikalien für In-vivo-Tests und schließlich für die klinische Anwendung in der Zukunft geeignet. Für weitere Produktinformationen kontaktieren Sie uns bitte unter: US-Tel: 1-844-782-5734 US-Tel: 1-844-QUAL-PEG CHN Tel: 400-918-9898 E-Mail: sales@sinopeg.com

J-Steuerungsfreigabe. 2024 Nov.:375:74-89. doi: 10.1016/j.jconrel.2024.08.049. Epub 2024 5. September. Optimierung eines anhängigen PEGylierten Linkers für Antikörper-Wirkstoff-Konjugate Zusammenfassung In dieser Arbeit haben wir Antikörper-Wirkstoff-Konjugate (ADCs) konzipiert und entwickelt, die den Wirkstoff nach enzymatischer Spaltung der Linker-Einheit durch Tumorproteasen effizient freisetzen können. Die von uns verwendeten Antikörper-Wirkstoff-Linker sind das Ergebnis einer rationalen Optimierung eines zuvor beschriebenen PEGylierten Linkers, PUREBRIGHT® MA-P12-PS, der hervorragende Wirkstoffbeladungskapazitäten aufwies, aber über keinen eingebauten Wirkstoffabgabemechanismus verfügte, was die Wirksamkeit des Ergebnisses begrenzte ADCs. Um dieser Einschränkung zu begegnen, haben wir uns entschieden, einen Protease-sensitiven Auslöser in den Linker einzubauen, um die Freisetzung eines „PEG-freien“ Arzneimittels in den Tumorzellen zu begünstigen und so wirksame ADCs zu erhalten. Derzeit basieren die meisten vermarkteten ADCs auf dem Val-Cit-Dipeptid, gefolgt von einem selbstzerlegenden Spacer zur Freisetzung des Arzneimittels in seiner unveränderten Form. Hier haben wir zwei unkonventionelle Peptidsequenzen ausgewählt, ein Phe-Gly-Dipeptid und ein Val-Ala-Gly-Tripeptid, und die eine oder andere zwischen dem Medikament auf einer Seite (N-Terminus) und dem Rest des Linkers, einschließlich PEG, platziert Einheit, auf der anderen Seite (C-Terminus), ohne selbstzerstörende Gruppe. Wir fanden heraus, dass beide Linker auf Cathepsin B, ein lysosomales Referenzenzym, reagierten und wie gewünscht einen PEG-freien Wirkstoffkataboliten freisetzten. Anschließend verwendeten wir die beiden Linker, um ADCs auf Basis von Trastuzumab (einem auf HER2 gerichteten Antikörper) und DM1 (einem auf Mikrotubuli gerichteten zytotoxischen Wirkstoff) mit einem durchschnittlichen Arzneimittel-zu-Antikörper-Verhältnis (DAR) von 4 oder 8 zu erzeugen. Die ADCs zeigten eine Wiederherstellung Zytotoxizität in vitro, die proportional zur DM1-Beladung war und im Allgemeinen höher für die ADCs war, die Val-Ala-Gly in ihrer Struktur trugen. In einem Eierstockkrebs-Mausmodell verhielt sich das auf Val-Ala-Gly basierende ADC DAR 8 besser als Kadcyla® (ein zugelassenes ADC von DAR 3,5, das in dieser Studie als Kontrolle verwendet wurde), was zu einer stärkeren Reduzierung des Tumorvolumens und einer längeren mittleren Überlebenszeit führte . Zusammengenommen stellen unsere Ergebnisse einen erfolgreichen Linker-Optimierungsprozess dar und ermutigen die Anwendung des Val-Ala-Gly-Tripeptids als Alternative zu anderen bestehenden Protease-sensitiven Auslösern für ADCs. Schlüsselwörter: Antikörper-Wirkstoff-Konjugat; Krebstherapie; Spaltbarer Peptidlinker; Arzneimittelabgabe; Optimierung; PEG. Für weitere Produktinformationen kontaktieren Sie uns bitte unter: US-Tel: 1-844-782-5734 US-Tel: 1-844-QUAL-PEG CHN Tel: 400-918-9898 E-Mail: sales@sinope

Moleküle. 2022 3. Dez.;27(23):8501. doi: 10.3390/molecules27238501. Entwicklung von Phosphoramidit-Reagenzien für die Synthese basenlabiler Oligonukleotide, modifiziert mit einem linearen Aminoalkyl- und Amino-PEG-Linker am 3'-Ende Zusammenfassung Oligonukleotide mit einem Aminolinker am 3'-Ende eignen sich zur Herstellung konjugierter Oligonukleotide. Allerdings können chemisch modifizierte Nukleoside, die unter basischen Bedingungen instabil sind, nicht mit der herkömmlichen Methode, die die Herstellung von Oligonukleotiden mit einem 3'-Aminolinker erfordert, in Oligonukleotide eingebaut werden. Daher haben wir Fmoc-geschützte Phosphoramidite für die Synthese basenlabiler Oligonukleotide entwickelt, die mit einem 3'-Aminolinker modifiziert sind. Die resultierenden Phosphoramidite wurden dann erfolgreich in Oligonukleotide eingebaut, die einen 3'-Aminolinker trugen. Zur Schutzgruppenentfernung wurden verschiedene Grundlösungen untersucht. Alle Schutzgruppen wurden durch zweistündige Behandlung der Oligonukleotide mit 40 %igem wässrigem Methylamin bei Raumtemperatur entfernt. Dadurch wurden die Entschützungszeit und die Temperatur im Vergleich zu den herkömmlichen Bedingungen (28 % NH3 aq., 55 °C, 17 h) deutlich reduziert. Darüber hinaus konnten die Oligonukleotid-Schutzgruppen mit einer milden Base (z. B. 50 mM Kaliumcarbonat-Methanol-Lösung) entfernt werden. Darüber hinaus wurden mit den entwickelten Phosphoramidit-Reagenzien basenlabile Oligonukleotide mit einem Aminolinker am 3'-Ende erfolgreich synthetisiert, was den Nutzen unserer Strategie unterstreicht. Schlüsselwörter: 3â²-Modifikation; Aminolinker; basenlabiles Oligonukleotid; konjugieren. Für weitere Produktinformationen kontaktieren Sie uns bitte unter: US-Tel: 1-844-782-5734 US-Tel: 1-844-QUAL-PEG CHN Tel: 400-918-9898 E-Mail: sales@sinopeg.com

Br J Hämatol. 2020 Mai;189(3):442-451. doi: 10.1111/bjh.16254. Epub 27. Dezember 2019. Patienten mit akuter lymphoblastischer Leukämie, die mit PEGAsparaginase behandelt werden, entwickeln Antikörper gegen PEG und den Succinat-Linker Zusammenfassung Polyethylenglykol (PEG)-konjugierte Asparaginase (PEGasparaginase) ist für die Behandlung akuter lymphoblastischer Leukämie bei Kindern unerlässlich. Wir haben einen Test entwickelt, der Antikörper gegen die PEG-Einheit, den Linker und das Medikament selbst bei Patienten identifiziert, bei denen Überempfindlichkeitsreaktionen auf PEG-Gasparaginase auftreten. Eingeschlossen wurden 18 nach dem DCOG ALL-11-Protokoll behandelte Patienten mit einer neutralisierenden Überempfindlichkeitsreaktion auf PEGAsparaginase auf die ersten PEGAsparaginase-Dosen in der Induktionsphase (12 Patienten) oder während der Intensivierung nach mehrmonatiger Unterbrechung (6 Patienten). ELISA wurde verwendet, um Antikörper zu messen, mit dem an BSA, PEGfilgrastim und Escherichia coli-Asparaginase konjugierten Succinimidylsuccinat-Linker zu beschichten und zur Konkurrenz hydrolysierte PEGAsparaginase und mPEG5.000 zu verwenden. Bei allen Patienten wurden Anti-PEG-Antikörper nachgewiesen (IgG 100 %; IgM 67 %), von denen 39 % ausschließlich Anti-PEG-Antikörper aufwiesen. Vorbestehende Anti-PEG-Antikörper wurden auch bei Patienten nachgewiesen, die zuvor kein PEGyliertes Therapeutikum erhalten hatten (58 % IgG; 21 % IgM). Antikörper gegen den SS-Linker wurden überwiegend während der Induktion nachgewiesen (50 % IgG; 42 % IgM). Anti-Asparaginase-Antikörper wurden während der Induktion nur bei 11 %, während der Intensivierung jedoch bei 94 % nachgewiesen. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass Anti-PEG- und Anti-SS-Linker-Antikörper vorwiegend eine Rolle bei der Immunantwort auf PEGAsparaginase während der Induktion spielen. Daher wäre die Umstellung auf native E. coli-Asparaginase eine Option für eine adäquate Asparaginase-Behandlung. Schlüsselwörter: PEGAsparaginase; akute lymphoblastische Leukämie; Antikörper. Für weitere Produktinformationen kontaktieren Sie uns bitte unter: US-Tel: 1-844-782-5734 US-Tel: 1-844-QUAL-PEG CHN Tel: 400-918-9898 E-Mail: sales@sinopeg.com

Rezension Nanomedizin (Lond). 2016 Apr;11(7):851-65. doi: 10.2217/nnm.16.28. Oberflächenfunktionalisierung von Goldnanopartikeln: gemischte Monoschicht versus heterobifunktioneller Peg-Linker Zusammenfassung Um eine klinisch relevante Behandlung mit Goldnanopartikeln (AuNP) zu erreichen, muss die Oberfläche mit mehreren Liganden wie Arzneimitteln, Antifouling-Wirkstoffen und Targeting-Einheiten funktionalisiert werden. Allerdings bleibt es eine Herausforderung, mehrere Liganden unterschiedlicher Chemie und Länge anzubinden und gleichzeitig sicherzustellen, dass sie alle ihre biologische Funktionalität behalten. Dieser Aufsatz vergleicht die beiden am häufigsten verwendeten Methoden der Oberflächenkofunktionalisierung, nämlich gemischte Monoschichten und heterobifunktionelle Linker. Obwohl es zahlreiche In-vitro-Studien gibt, in denen beide Oberflächenanordnungen erfolgreich eingesetzt werden, besteht wenig Einigkeit über ihre relativen Vorzüge. Tierstudien und präklinische Studien haben die Wirksamkeit der Funktionalisierung gemischter Monoschichten gezeigt, und obwohl einige vielversprechende In-vitro-Ergebnisse für AuNPs mit PEG-Linker-Cap berichtet wurden, sind mögliche Vorteile des Ansatzes noch nicht vollständig verstanden. Für weitere Produktinformationen kontaktieren Sie uns bitte unter: US-Tel: 1-844-782-5734 US-Tel: 1-844-QUAL-PEG CHN Tel: 400-918-9898 E-Mail: sales@sinopeg.com

J Mater Chem B. 2021 Apr 7;9(13):2993-2997. doi: 10.1039/d0tb02911d. Epub 2021, 16. März. Ein kurzer PEG-Linker verändert die In-vivo-Pharmakokinetik von Trastuzumab, um kontrastreiche Immuno-PET-Bilder zu liefern Zusammenfassung Die verlängerte Blutzirkulation der radioaktiv markierten Antikörperkonjugate ist bei der Verwendung der Immun-PET-Bildgebung aufgrund der erhöhten Strahlenbelastung und des längeren Krankenhausaufenthalts, der bis zur Entwicklung eines ausreichenden Kontrasts erforderlich ist, problematisch. Im Gegensatz zur vorherrschenden Annahme, dass PEGylierung die Blutretentionszeit verlängert, beobachteten wir, dass ein PEGylierter Antikörper mit einem kurzen PEG8-Linker im Vergleich zu seinem nicht PEGylierten Gegenstück viel schneller aus dem Blut entfernt wurde und gleichzeitig die Tumoraufnahme aufrechterhielt. Brusttumoren wurden bereits 24 Stunden nach der Injektion in der Immuno-Positronen-Emissions-Tomographie (PET)-Bildgebung deutlich mit einem sehr hohen Tumor-zu-Hintergrund-Verhältnis sichtbar gemacht. Für weitere Produktinformationen kontaktieren Sie uns bitte unter: US-Tel: 1-844-782-5734 US-Tel: 1-844-QUAL-PEG CHN Tel: 400-918-9898 E-Mail: sales@sinopeg.com

Biosens Bioelektron. 2019 Sep 15:141:111477. doi: 10.1016/j.bios.2019.111477. Epub 25. Juni 2019 Neuartiges thioliertes PEG-Linkermolekül für die Biosensorentwicklung auf Goldoberflächen Zusammenfassung Die oberflächenmodifizierenden Linkermoleküle können die Leistung und Langlebigkeit von Biosensoren direkt beeinflussen. Sie müssen die Anbringung einer biologischen Erkennungsschicht auf der Sensoroberfläche sowie den Schutz der Oberfläche vor Fouling-Effekten ermöglichen. Jüngste Fortschritte auf diesem Gebiet haben mehrere Schlüsselfaktoren identifiziert, die die Effizienz, Stabilität und den Antifouling-Effekt einer durch oberflächenmodifizierende Linkermoleküle gebildeten Schicht erhöhen können. Hierin stellt diese Arbeit ein einfaches Syntheseverfahren, die Charakterisierung und die Anwendung eines neuartigen thiolierten PEG-Oberflächenmodifizierungsmoleküls (DSPEG2) vor, das als Mehrzweck-Linker für Goldoberflächen fungieren könnte. Die Analysen der molekularen räumlichen Verteilung von DSPEG2 auf Goldoberflächen wurden mithilfe der Flugzeit-Sekundärionen-Massenspektrometrie (TOF-SIMS)-Bildgebung und der röntgenphotoelektrischen Spektroskopie (XPS) durchgeführt. Die Immobilisierung von DSPEG2 auf Goldoberflächen wurde mittels Cyclovoltammetrie (CV), elektrochemischer Impedanzspektroskopie (EIS) und Oberflächenplasmonresonanz (SPR) untersucht. Unsere vorläufigen Ergebnisse zeigten, dass DSPEG2 ein vielversprechendes neues Linkermolekül ist, das in einer Vielzahl von Biosensoren auf Basis von Goldoberflächen eingesetzt werden kann. Schlüsselwörter: Antifouling; Biosensor; Zyklische Voltammetrie; Elektrochemische Impedanzspektroskopie; Unspezifische Adsorption; PFLOCK; Oberflächenplasmonresonanz; Synthetischer Linker. Für weitere Produktinformationen kontaktieren Sie uns bitte unter: US-Tel: 1-844-782-5734 US-Tel: 1-844-QUAL-PEG CHN Tel: 400-918-9898 E-Mail: sales@sinopeg.com